一.題目：
 

        細菌的冷凍保存存活曲線

二.目的：
 

        培養細菌一個半小時取樣一次以及達靜止期後取樣一次，稀釋十倍於PB溶液之中，之後將其置於4℃冰箱保存一
週，連續稀釋後塗抹於plate上。利用生長於plate上的菌落數，我們可以描繪出細菌的survival curve，並觀察保存後菌落形態和特徵上是否有變異。

三.結果：
 

        我們在指數期取樣一次(培養一個半小時)，靜止期取樣一次。取100λ到900λ的PB中，置於4℃冰箱保存一週，將培養液連續稀釋後，將菌液塗抹到plate上，經過培養一天和一週後計算菌落數，所選的稀釋度分別是:
 

 四.討論：
 

• 保存於4℃細菌已經無法生長，因為其所最適宜生長溫度是在32℃，可知其非嗜冷菌故猜想在4℃時菌已經停止生長，又稀釋在PB之中更不可能有生長，以保存來說，4℃時菌可能會降低代謝率達近乎於沒有，時間過長可能導致死亡，加以沒有養份供應，存活率非常低，所以我們這組可能就是因為如此所以都沒有長出菌來，也有一個可能性是存活率太低，但我們所取的稀釋濃度過低，以致於濃度太稀而菌落長不出來。猜想如果冷凍的時間不要太長或者是稀釋倍數降低或許可以得到結果。

 

 
 
 

• 在plate放置於32℃培養到一週後，也並沒有長出菌落，不過在靜止期10^-6稀釋度的其中一個plate有長出兩個菌落，不過都看到大顆的菌落，與先前我們所看的的菌落形態不太相像，另一個plate則是延plate四周最外圍長出菌落，不過由於都長連在一起了，所以看不出是否是我們的菌還是污染，雖然有觀察到這兩個plate，不過還是不能幫助我們解釋實驗失敗的主因，還是歸咎於稀釋倍數太低為一個主因，或者是菌以進入一種近似休眠的狀態，故在長時間的培養之後才有辦法恢復生長能力，但污染的可能性也頗大，所以無法確定。