蝴蝶蘭的種子,在果莢成熟時,胚仍十分原始,而未分化, 在自然界下發芽率很低,需要與蘭菌共生才會發芽。早期組織 培養未發達的時代,人們常將成熟的蘭花種子灑在母株根旁, 提高發芽率。如果利用無菌播種方式來繁殖,發芽率大幅度的 提高"但是以播種方式繁殖有些交配所得實生苗變異極大,所以 此種方法只能運用在較不會產生分離的品種或原生種,或者運 用於育種。今將使用方法敘述於後。 1.材料:建議取受粉後150天的果莢。採收果莢時間太早,胚發育 不全,發芽率低,又時間太長,因而果莢會破裂,造成消毒處 理上的麻煩。 2.消毒:將果莢採回置於無菌操作箱內,先以棉花沾70%之酒精 擦拭果夾表面及溝紋,將一些污垢、塵土擦拭乾淨。如果果萊表 面沒有裂開,將整個果莢放入容器中,以次氯酸鈉(Sodium. hypochlorite with active chlrite 5%Cl。)稀釋10倍,加一滴 展著劑,充分搖盪.消毒15分鐘,再以無菌水沖洗數次備用,即 消毒果莢.而不消毒種子,可免種子有時會受到消毒水的傷害。 果莢表面若已裂開,用消毒過的解剖刀將果莢切開.將種子取出 放入容器中,同樣以次氯酸鈉稀澤10倍,滴1一2滴展著劑,充分 搖盪,消毒15分鐘後。倒於覆有濾紙的漏斗(已經殺過菌)過濾, 再利用無菌水沖洗,充分洗淨次氯酸鈉;即可播種。 3.播種:將消毒過的果萊用解剖刀切開,直接用消毒過的播種 勺刮取種子或刮取濾紙上的種子,均勻播在培養基上。 4.培養情形:蝴蝶蘭種子播種後7一14天左右,胚即吸水澎大,逐 漸撐破種皮,形成淡黃色之原球體,30天後頂端分生組織突出, 原球體慢慢轉成綠色,下半部有散射狀之吸收毛分佈,播種40 天後,第一卡擬葉產生,60天產生第二片,75天分化第一片葉原 體,播種後T00天左右由莖頂基部分化長出根,在原球體階段。 播種後35一45天時,可移入促進原球體生長的培養基,如此也可 增大生長空間 在小苗生長具有1公分長的葉片及根時,再換入促 進小苗生長的培養基,待葉片生長達3一5公分時就可移出瓶外種 植,從播種到出瓶需時約半年。
1.果莢再未破裂前採收 | 2.果莢採收後,將上下二端剪除 | 3.以次氯酸鈉消毒15-20分鐘 |
4.無菌箱內準備播種 | 5.夾出果莢忽碰觸瓶口 | 6.用消毒過的手術刀 將果莢剖成二半 |
7.用鑷子輕輕地 將種子剝入三角瓶中 |
8.稍加搖動,使種子均勻散佈 | 9.寫上播種日期及父母本 |