一般組織培養均取具有分生能力的頂芽來進行培養,但蝴蝶
蘭是屬於單莖類蘭花,祇有一莖頂生長點,取此生長點進行培養
時,就犧牲了原株,以此方式養不大適合蝴蝶蘭繁殖 而觀察蝴蝶
蘭各器官中,以花梗當作組織培養繁殖的材料,最為適合.其原
因在於材料的取得,對母株傷害最小 2.花梗消毒容易,成功率
高,3﹒開花時可由觀察得知花朵特性,花朵可利用於交配育種,
得到實生苗,花序頂梢及花梗芽可取為組織培養材料,得到分生
苗,可謂一舉數得,但此法最大缺點,若母本帶有毒素病,則可
借花梗分生苗的大量繁殖,使病源更加速傳播。故繁殖前先檢定
母株有無毒素病,確定健康株再分生繁殖。
蝴蝶蘭通常由花梗基部(近母株處)算起在第6、7節才會分化
花朵。除最基部第一節外,剝開位於開花節位以下各節的苞片,
皆可見到芽,連同花序頂梢,都是花梗芽組織培養的好材料。今
將操作程序說明如下:
1﹒材料:
進行蝴蝶蘭花梗芽培養,材料的取用時期所受限制不大,從
蝴蝶蘭有花梗產生開始,到花朵凋謝後,只要花梗尚綠未枯黃。
都可用來當作培養材料。
2﹒消毒:
(l)剪下來的花梗,用棉花沾70%的酒精,將外表一些灰塵、雜
物擦拭乾淨,然後放在無菌操作台上,以節為單位切成段,
每段節上留2公分,節下留3公分。含芽花梗培殖體,上下留
不同長度,是為了在插入培養基中培養時,不會因上下顛倒
,而影響其生長。
(2)將切成段的花梗節芽上的苞葉去除,並以解剖刀把節與芽相
接處處理乾淨。另外在梗段表面如有病斑或焦枯的部分,應
以解剖刀削去。
(3)經前處理的梗段,放入消毒水中消毒,消毒水成份是經過殺
菌釜殺菌過的去離子水(或蒸餾水),加次氯酸鈉,配成0.5%
的水溶液,另加入3一4滴展著劑。消毒的時間依材料、質地
、嫩度不同而異。一般花朵盛開或花朵已謝的成熟花梗,消
毒時間為15到20分鐘,如果是比較嫩的組織,將時間縮短為
10分鐘到12分鐘。而在消毒期間,能搖動一下瓶子,使藥劑
能充分作用,加強消毒的效果。如果有超音波洗淨器
(Ultrasoniccleaner),可縮短消毒時間。消毒的時間全靠
經驗判斷,時間太短消毒不完全,太長又容易傷害培殖體。
(4)消毒時間到時,將消毒水倒掉,然後用無茵水(蒸餾水經殺
菌釜滅菌40分鐘)沖洗2到3次。
3.培養:
(1)將消毒完畢的花梗段.放在消毒過的培養基中,用銳利的
解剖刀,截去二端被次 酸鈉漂白部分各1公分,並將其插
入培養基中。
(2)培養環境,光度至150Olux,每日16小時的照明(一般40W
日光燈),並在28℃的溫度下生長。
4.培養情形:
經上述步驟處理後,花梗芽培養一星期後可見到芽要
突出肥大的情形,生長速率快者,經過二星期,可達1公分以上,
培養時因梗芽所取的位置,生長的時期,狀態、品種、培養基的
成分、培養環境,這些條件的不相同,使芽的生長形態也不相同,
最常見的有兩種,一種行營養生長,長出葉片或一植株,另一種
長出花梗,一般所取材料組織較嫩或栽培環境溫度較低,芽大多
抽出花梗,而所取組織較老,栽培環境溫度較高,大多長出葉而
形成一植株。頂芽絕大部分會先抽長,由芽抽出之花梗,如不另
行移植,則會由頂端及節處長出葉片。
5.其他注意事項:
或許有人問起,要做花梗芽培養,所取材料在那一時期較合
適,又材料取下來量大多一下子不能處理時,又怎麼辦:其實,
花梗芽培養是最簡單,材料也不會限制很嚴,只要花梗仍呈綠色
不管花朵是開是謝,都能成功。筆者曾經取一花梗,頂芽及半支
花梗都已枯萎,但花梗下部節上的芽,仍然能培養成功。另外曾
經取插在瓶中達半個月的切花,花序頂芽或花梗節芽都能培盞或
功,成功率可達90%以上。
花梗芽培養,成功與否最重要因素在於消毒,而消毒要成功
主靠消毒時間的控制,時間太少消毒不完全,太多又傷害培殖體,
時間控制又不是一成不變。還要考慮到材料本身,因比只有靠多
做.在失敗中求取經驗,沒有捷徑可尋。一旦芽萌發長出,不論
是長葉、抽梗,均可加以利用繼代培養繁殖。