工作三、Western blot

      目的：

       拿Hela（human）、HEK293（human）、COS-1（monkey）、NIH3T3（mouse）、MDCK（conine）此五種
       
       cell line的核與cytoplasm的部分，測試其（MTR10TRN-SR2）的存在與否以及得知其分子量，當作

       Western blot的練習

      
    實驗流程：

          
          作兩面8﹪的SDS-PAGE（因為所預測之分子量大約是100kDalton）

 

          依Marker、HeLa、HEK293、COS-1、NIH3T3、MDCK的順序load入，核的與cytoplasm的各load一片

 

          Transfer到NC membrane上

  

          以1：200的MTR10antibody一抗標定

 

          以1：2000的二抗(anti-rabbit Ig)標定

 

          ECL

      工作三實驗結果：

      

      
       討論:

       
       1、在cytoplasm的部分(上半部)其實每個sample都有band，但因為這片底片曝光時間還不太夠，

          所以看不太清楚

       2、此四種species的MTR10都可被human MTR10的antibodies辨識，且分子量大小相似表示它們之間有

           Conservation

       3、可初略判斷出此五種species裡MTR10的含量在核裡比在cytoplasm裡多