奇異球菌在PCA及PCB內生長的差異
1. 簡介：
當我們利用平板技術肉湯(m plate count broth；PCB)來培養細菌時，可以發現菌數會成長到一定的密度，之後便不會再增加。我們把這樣的生物特性稱為數量感應(Quorum sensing)。另外，在平板技術瓊脂(plate count agar；PCA)上培養細菌，我們可以發現一個菌落中，是數個細菌緊密地疊在一起的。以密度來看，在PCA上的一個菌落中，疊在一起的細菌勢必比在PCB中懸浮的細菌密度要大，不過在PCA上這樣的菌落仍然能繼續變大，反應出PCA上的菌落中的細菌似乎沒有表現出如之前所提到的數量感應特性。這兩種情況之間勢必存在著一些差異。如果能了解影響數量感應的關鍵，或許我們能針對這個因素進行突破，使奇異球菌的生長能突破原來的極限值(約2*10^8個/ml)。
首先觀察細菌在兩種環境中的差異之後，我們可以做一些假設：a. 奇異球菌在PCB中生長時，會因為容器搖晃使得細菌與細菌之間會有一定程度的碰撞，這樣的碰撞會影響細菌的生長；反之，在PCA上的細菌是很平靜地一個一個疊起來，碰撞較少。因此在PCA上的菌落能夠不斷的變大。b. PCA上的細菌進行分裂後，其子代細菌便待在原來的細菌旁邊。不過在PCB中的細菌，隨時會與跟自己關係很遠的細菌相遇，或許它會對關係較疏遠的細菌產生排斥感，影響到自己的生長情形。c. 在PCB當中生長的細菌，雖然能獲得的養分充足，不過細菌代謝所產生的廢物也混合在PCB中，廢物太多會使細菌無法生長，不過在PCA上，代謝物似乎更不易與菌體隔離，故這點不足以成為兩環境的差異性。不過代謝物的多寡本身是可以成為影響細菌生長的指標的。對於這幾點因素，進行了一些實驗，希望能找出並了解影響細菌生長的要素。
2. 材料：
實驗菌種是Deinococcus radiodurans IR，生長環境是32度C。液體的培養基是使用plate count broth（PCB；每公升含5g的酵母抽出物，1g的trypton，2g的dextrose；Difco）。固體的培養基是使用plate count agar（PCA；每公升含2.5g的酵母抽出物、5g的digset of Casein，1g的dextrose，15g的agar；Difco）。試管培養是在往復振盪培養箱（reciprocating shaker incubator model-S401R，120rpm）。平板培養是在incubator model RI-102。緩衝溶液是磷酸緩衝溶液（phosphate buffer；PB；0.067M，pH7.0，每公升含4.73g的Na2HPO4及4.54g的KH2PO4），作用為菌液的稀釋。

實驗：

更換培養基
自一管達平衡濃度的菌液中取100微升，加入10毫升的PCB，在攝氏32度下搖晃培養，每十二小時取樣測菌數。
培養達第三天時，將此菌液離心並且除去上清液，加入新的PCB繼續培養，每十二小時取樣測菌數。同樣的方法，但是將試管培養改成用15毫升離心管培養；培養箱的搖動不致使此菌液完全混合，菌會沉澱在管底。


分管混合培養
自一管達平衡濃度的菌液中取100微升，加入10毫升的PCB，在攝氏32度下搖晃培養，同樣的方法做三管，標示A1、A2、A3，每十二小時取樣測菌數。
培養達第三天時，自 A1中取出120微升加入100毫升PCB，標示B1；同樣的自A2、A3分出菌，標示B2及B3。自A1及A2各取60微升加入100毫升PCB，標示B12；同樣的方法製作B13及B23。自A1、A2和A3各取40微升加入100毫升PCB，標示B123。B組也在攝氏32度下培養，每十二小時取樣測菌數。
實驗記錄：見原始檔案