| A.
初分離的Fetuin
(未標定螢光物, ES Mass, per-methylation) |
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可以看出來有四個主要的peak，可能是含量較多的glycan。 |
| B.
依照charges分離的Fetuin
labeled with AA。 |
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最左是過量的AA反應物。主要有三個明顯的peaks
(red circle)，再做MALDI MS analysis後，分別鑑定為於有二、三、四個
Sia 的 glycan。有個不明顯的peak
(blue circle)，猜測是帶有一個Sia的
glycan，但MS
analysis沒有明顯的結果。 |
| C.
依照charges分離的Fetuin
labeled with 2-AB。 |
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這張有很明顯四個peak，經MALDI
MS analysis後，分別鑑定為於有一、二、三和四個Sia的glycan。 |
| D.
MALDI Mass of fetuin labeled with AA. |
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這是fetuin接上AA標定後的MALDI
MS。很清楚的看到主要的peak 有四群 (red
circle)。 |
| E. |
AA與2-AB在跑NPHPLC的效果來看，各有優缺點。對AA來說，其resolution較好，而得到的螢光質也比較高，其noise
to ratio也不錯，但在此實驗中，resolution只要足以分出不同charge即可，在B中可以看到AA連同樣charge但可能是結構不同的glycan也可分開，而形成一種干擾。對2-AB來說就沒有這樣的問題，noise
to ratio 也相當不錯，然而跑NPHPLC的時候發現，真正測到的螢光數質不高，必需放大倍率才能看到，這可能會造成開始分離時，錯失收集fraction的機會。總而言之，在以NPHPLC來分離不同charge的glycan上，2-AB比AA更合適用來做標定。 |
