Methods
1. 把TCF4的 DNA sequence 插進pAS2-1 之plasmid中
把一些 library protein 的 DNA sequence 插進pACT2 之plasmid
2. transform 到E.coli中大量複製
3. 利用Boiling miniprep 抽少量的plasmid DNA,再用restriction enzyme
check 是否有 insert進去正確的DNA sequence
4. 利用Large scale amplication of plasmid 的方法抽大量的plasmid
DNA
5. transform 到 yeast 中表現 , 再藉由 yeast two-hybrid assay ,若
TCF4 和 library protein有 interaction(須有IPTG induced)則會
在X-Gal 之 indicator上有 turn blue的情形產生
6. 找出 library protein的DNA sequence,再利用 computer programs
找出適合是何種蛋白質