Materials & Methods
首先，將三種質體，分別是大表面抗原野生型（large S wild type, w）、大表面抗原突變型（large S mutant, △2）及小表面抗原（small S, △pst），與帶有neo基因的質體進行共同轉植（cotransfection）至取自BALB/c小鼠的ML-14a肝癌細胞株內，再以G418為篩選標記。再由蛋白質和mRNA兩個層次觀察細胞素的表現：
一、 由蛋白質層次觀察細胞素（cytokines）的表現：
將轉殖的ML-14a細胞以免疫組織化學染色（immunohistochemical staining），偵測是否有B型肝炎表面抗原(HbsAg)產生，以確定轉殖有成功。在細胞能表現大量的B型肝炎表面抗原(HbsAg)的情況下，以免疫組織化學染色觀察細胞素IL-10及TGF-β的表現情形，比較ML-14a、wild type,、△2 mutant、△pst mutant 等，轉殖細胞其細胞素（cytokines）的表現程度。
二、 由mRNA層次觀察細胞素（cytokines）的表現：
萃取的ML-14a細胞的mRNA，先以β-actin基因(一種housekeeping-gene)的primer做聚合酵素連鎖反應(PCR)，因為正常細胞會持續表現來β-actin，所以可以利用β-actin是否表現來確認沒有genome DNA的污染。如果抽到的RNA樣品中沒有DNA污染，針對DNA所設計的primer不能接上RNA，PCR也就做不出產物，gel上應該沒有band出現。
確定了萃取的RNA沒有DNA污染之後，以spectrophotometer測定定RNA的濃度，及260/280的比值，品質好的樣品260/280比值應介於1.6∼1.9。之後再將RNA以逆轉錄酵素- 聚合酵素連鎖反應（RT-PCR），將RNA翻成cDNA，再放大，偵測IL-10、TGF-β、IL-6、IL-12、IL-1的表現。比較ML-14a、wild type,、△2 mutant、△pst mutant 等，轉殖細胞其細胞素（cytokines）的表現程度。