Results & Discussion

一、 免疫化學染色(immunocytochemistry:):


HbsAg
::除了對照組ML-14a沒有表現HbsAg外,wild type,、△2 mutant、△pst mutant,都有表現十分多的HbsAg,表示轉殖有成功。


IL-10

一級抗體-稀釋 200X 、250X 、300X
結果:200X:all positive
250X:可看出ML1、△pst比 wt、 △2表現較多的IL-10
300X: all negative
由上述實驗結果發現,一級抗體的稀釋倍數為250X時,可看得出IL-10表現量的不同。若一級抗體,濃度為200X,則背景值會太高。若一級抗體,濃度為250X,濃度太低,則無法看出結果。此外,還發現當細胞培養的越久,△pst比 wt、 △2這兩種plasmid更容易被細胞排除。


二、RT-PCR



除了internalcontrol GADPH外,其餘都沒有表現。
討論:RT-PCR的結果與免疫化學染色的結果並不符合,但無法判定對錯。因為免疫化學染色的control只有secondary only control(不加一級抗體),而且缺少positive control。而RT-PCR的negative control是不加RNA,positive control則是廠商提供的,由這些證據尚無法有力地支持實驗結果。考慮可以在以後的實驗中,加已確定會表現某種細胞素的細胞做為positive control,如:被塵蹣刺激過的巨噬細胞。和已確定不會表現某種細胞素的細胞做為negative control,這樣的實驗才能證明是不是真的有表現某種細胞素。