Summery
以下流程將簡述本實驗室一般解結構的蛋白純化標準步驟
質體轉化 |
↓
培養,表達 |
↓
離心(4000,12min)
↓
上清 |
沉澱 (含蛋白的菌) |
↓
buffer沖取
↓
超聲波碎菌 |
↓
離心(12000rpm,30min)
↓
上清 (蛋白質) |
沉澱 (菌渣) |
↙(取上清)
離子管柱層析 洗柱 ↓ 上樣 ↓ 洗脫 ↓ 或重複進行,直到波形完整 |
↓ ↘
SDS-Page 測量純度與目標蛋白存在 |
離心濃縮 |
↘
養晶,X-Ray繞射 解結構 |
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